研究多重耐藥蛋白4在第二型糖尿病併發阿斯匹靈阻抗之角色(1/3)

血小板在止血功能以及心血管疾病的病程裡皆扮演著重要角色，重要的是，糖尿病患者要比 一般民眾更容易因心血管疾病而危害到生命。目前，阿斯匹靈是糖尿病併發心血管疾病患者 中最重要的一級或二級的預防用藥。然而，在以往的臨床試驗上卻發現糖尿病患者要比起沒 有糖尿病的患者更容易產生阿斯匹靈阻抗現象(aspirin resistance);直至目前的研究，阿斯匹靈 阻抗的機轉仍然不清楚。近期，有研究推測接受過冠狀動脈手術的病患，其血小板會將阿斯 匹靈導出細胞外，且發現阿斯匹靈阻抗現象似乎與多重耐藥蛋白4 (MRP4)轉移至細胞膜上有 關聯性。然而，在我們先前的研究也指出多重耐藥蛋白4會將cAMP排出細胞外並增強血小 板活性；這些證據顯示多重耐藥蛋白4與阿斯匹靈阻抗是有關聯性。此外，醣醛還原酶是多 元醇路徑中主要的酶，此還原酶又與異常的醣代謝及部分糖尿病病症有相關。然而，醣醛還 原酶是否調控多重耐藥蛋白4，並且造成阿斯匹靈阻抗現象目前仍然不明。因此，在這研究 計晝中，我們將探討糖尿病血小板中多重耐藥蛋白4在阿斯匹靈阻抗現象中所扮演的角色以 及利用模擬人類第二型糖尿病動物模式來進一步研究多重耐藥蛋白4與醣醛還原酶的關聯 性。 具體目標第1年：闡明多重耐藥蛋白4在高糖所誘導阿斯匹靈阻抗中所扮演的角色。在第一 年，我們將確認血小板在高糖環境下是否會降低阿斯匹靈抑制血小板的作用，利用 deconvolution microscope和穿透式電子顯微鏡(TEM)來偵測多重耐藥蛋白4的分布以及利用 液態層析質譜儀(LC-MS/MS)分析阿斯匹靈排出細胞外的含量；此外，我們將利用clot retraction和血小板功能分析儀進一步驗證高糖環境是否會降低阿斯匹靈抑制血小板的作用。 具體目標第2年：探討在第二型糖尿病動物模式中多重耐藥蛋白4所扮演的角色。在第二年， 我們將利用第二型糖尿病(LDLR-/- mice)小鼠模式來進一步驗證多重耐藥蛋白4在其血小板中 是否過度表現或以及分布；並將阿斯匹靈排出血小板外，進而影響阿斯匹靈抑制血小板的作 用，導致阿斯匹靈阻抗現象的產生。另外，我們將利用fluorescein sodium所誘導的腸繫膜血 管栓塞的動物模式來觀察已發生阿斯匹靈阻抗現象之糖尿病血小板對血栓形成的影響。 具體目標第3年：研究多重耐藥蛋白4與醣醛還原酶之間的關係。因小鼠表現相當少的醣醛 還原酶，所以在第三年中，利用醣醛還原酶轉殖鼠(huAR-LDLR-/- mice)來模擬人類第二型糖 尿病，我們將再一步驗證醣醛還原酶的過度表現是會促使多重耐藥蛋白4在血小板中的分布 改變；另外，我們亦使用抑制劑來驗證醣醛還原酶在血小板活化中所扮演的角色。最後，我 們將利用腸繫膜血管栓塞及小鼠中風模式並在合併使用醣醛還原酶抑制劑或多重耐藥蛋白4 抑制劑來觀察其血小板對血栓形成的影響。 請概述執行本計晝可能產生對社會、經濟、學術發展等面向的預期影響性(一百五十字内）。 本計晝預期MRP4與糖尿病併發心血管疾病患者中所產生的aspirin resistance有極大的關聯性 。此研究顯示aspirin resistance與MRP4的過度表現相關，並降低aspirin抑制糖尿病血小板 活化的效力；在學術發展上，亦提供了另一個血小板活化機制的研究方向；在臨床上也提供 了改善aspirin resistance的對策；在社會和經濟上提高aspirin的預防效果進而漸少醫療資源的浪費。