肺纖維化之轉譯研究－ADAM 17在缺氧誘導CTGF表現及肺部纖維化之角色(3/3)

持續性進行的呼吸道纖維化和缺氧是慢性阻塞性氣喘(chronic obstructive asthma, COA)棘手的問題。許多的研究顯示，缺氧及增加A Disintegrin and Metalloproteinase-17 (ADAM 17)和connective tissue growth factor (CTGF)過度表現在組織纖維化中扮演著重要的角色。本研究我們將探討ADAM 17在缺氧誘導CTGF表現和肺部纖維化的角色。我們發現在WI-38中缺氧可依時間依賴增加CTGF的表現。WI-38細胞給予ADAM 17抑制劑(TAPI-0)、furin抑制劑(CMK)、Notch1 siRNA、RSK 1 siRNA、C/EBPb siRNA和CTGF結構的AP-1位點突變會抑制缺氧誘導CTGF表現或CTGF-luciferase的活性。缺氧會誘導ADAM 17之Thr735磷酸化或ADAM 17活性可被CMK所抑制。細胞給予缺氧刺激可增加NICD的形成，此現象可被TRAP-0抑制。缺氧會誘導c-Jun Ser63磷酸化、c-Jun和NICD複合物的形成及導致cJun和NICD結合至CTGF啟動子AP-1的結合序列之中。再者，缺氧誘導纖維母的分化及a-smooth muscle actin (a-SMA)的表現可被Notch1 siRNA、TAPI-0或anti-CTGF抗體所抑制。我們也發現在慢性阻塞性氣喘病人的肺纖維母細胞中，ADAM 17、磷酸化的ADAM 17及CTGF表現比正常人類肺纖維母細胞來的高。缺氧誘導ADAM 17表現會被RSK1 siRNA和C/EBPb siRNA所抑制。缺氧可誘導C/EBPb之Thr217磷酸化、C/EBPb-luciferase活性增加及導致C/EBPb結合至ADAM 17啟動子序列之中。缺氧誘導C/EBPb-luciferase活性會被RSK1 siRNA所抑制。當給予ovalbumin (OVA)或bleomycin時，ADAM17條件性剔除小鼠其肺部纖維化、fibronectin、a-SMA及CTGF表現比野生型小鼠來的少。綜合以上的結果，我們結論furin/ADAM17/Notch 1在缺氧誘導CTGF的表現扮演著重要的角色。RSK1/C/EBPb媒介ADAM 17表現，且ADAM 17過度產生在呼吸道纖維化扮演著重要的角色。我們的結果提供發展降低慢性阻塞性氣喘病人因缺氧引發呼吸道纖維化治療的策略方針。