卵巢透明亮細胞癌紫杉醇抗藥性機制探討-從藥物運輸蛋白質基因拷貝數及表現異常到細胞能量利用及代謝路徑變動的研究

卵巢透明亮細胞癌雖在上皮性卵巢癌比例相對較低，但在日本和台灣的發生率卻偏高而且病人的預後較差常對化療藥物有較高的抗藥性。此類腫瘤被發現有其獨特的基因標記包括基因變異、表觀修飾差異及特殊的訊號傳遞組合，唯目前對其高抗藥性的發生機轉仍未完全瞭解。我們以比較基因組雜交微陣及轉錄體分析卵巢透明亮細胞癌細胞株ES2及所建立對紫杉醇有更高抗性的衍生細胞(ES2TR)分析發現在ABC-binding cassette (ABC-) 及solute carrier (SLC-)轉運蛋白基因所在區域發生有紫杉醇抗性相關的DNA拷貝數目異常及差異表達的特定藥物運輸相關蛋白質基因群。相較其它的亞型，這類腫瘤的細胞增殖較慢但對能量需求卻較高，而藥物運輸相關蛋白質的功能有可能與細胞內能量代謝路徑有關，我們以海馬生物能量測定儀發現兩株具更高抗性的ES2TR與ES-2細胞執行糖解排除至胞外的氫離子速率是相似的，但卻有較高的粒線體氧氣消耗率。因此本計畫將聚焦於具差異性表達及發生DNA拷貝數目異常的藥物運輸蛋白相關基因與此種腫瘤呈現的高紫杉醇抗藥性的相關性，提出假說假以驗證:「卵巢透明亮細胞癌可能因為藥物轉運蛋白質、包括ABC-及SLC-transporter基因體的拷貝數變異或基因異常的表現，牽動細胞內代謝路徑及能量利用，改變細胞的對紫杉醇作用的反應而呈現高抗藥性」。最終瞭解此異質性較高的特殊腫瘤就其粒線體能量變動及細胞代謝路徑的改變，瞭解癌細胞如何發展出特殊的藥物運輸細胞降低化療藥物對癌細胞的毒殺而存活。本計畫的研究架構及逐年預計完成的研究目標如下:一、以正常卵巢上皮OSE2a與透明亮細胞癌ES2及兩株ES2TR細胞株，釐清藥物運輸包括ABC-及SLC-transporter基因，在RNA及蛋白質層次的表現及該蛋白質在細胞內的分佈，是否與卵巢透明亮細胞癌對紫杉醇的敏感性有關並，以其它卵巢透明亮細胞癌細胞株確認相關性。(第一年)二、釐清與紫杉醇抗性相關的藥物運輸ABC-及SLC-transporter基因表達的改變，是否與此腫癌細胞能量重塑及代謝路徑的變動有關，並系統性的進行代謝體比較看是否最終可以反應至此類腫瘤高能需求的特性。(第二年)三、探討此腫癌細胞中異常表達的ABC-及SLC-transporter及細胞高能需求的變動，透過何種訊息傳遞及存活機制，呈現其對紫杉醇的高抗性。(第三年)