探討Dicer在肝癌細胞對sorafenib抗藥性的影響及其調控機制

肝癌是人類主要的癌症之一，由於缺乏早期明顯的症狀，患者大多在確診時已是癌症晚期。肝癌的 發生率及致死率高居不下，但是治療效果卻十分有限，目前以放射治療、手術切除及標靶藥物為主要 的治療方向。口服抗癌藥物sorafenib是標靶治療晚期肝癌的第一線藥物，然而部分病人對於sorafenib 的治療反應不佳，甚至隨著治療時間的增加產生抗藥性。因此了解抗藥性產生的分子機制是相當重要 的。近來許多證據顯示腫瘤細胞中的微核醣核酸表現失調會干擾其對於藥物的敏感性。Dicer是主要製 造微核醣核酸的酵素，在其生合成的過程中扮演著重要的角色，許多癌症中也發現Dicer會調控腫瘤的 發展，與癌症的侵犯、預後和存活率有關。目前對於Dicer如何影響後天獲得之抗藥性仍然尚未清楚。 為了研究Dicer參與肝癌細胞中sorafenib抗藥性相關的分子機制，實驗的設計將劃分以下三個主要目標 來完成： 目標一：探討Dicer對於sorafenib抗藥性肝癌細胞的作用與影響。 1-1.建立肝癌sorafenib抗藥細胞株。 1-2.探討Dicer對肝癌癌化進程的影響：在過度表現或易彳除Dicer的細胞株中測試對sorafenib的敏感 性、癌幹原性(幹細胞球狀體形成能力、幹細胞表面蛋白分析及觀察幹細胞標記表現量)與皮下 腫瘤在動物模式中的形成。 1-3.分析肝癌病人檢體中Dicer的表現與sorafenib抗藥性的關係。 目標二 ：探討在sorafenib抗藥性肝癌細胞株中調控Dicer表現的因子之角色及功能。 2-1.研究調控Dicer的分子機制是透由轉錄、轉錄後、轉譯、轉譯後的調控或者其他方式。 2-2.分析調控Dicer的上游分子。 2-3.探討上游分子與Dicer的關連性及其生物學意義。 目標三：在動物體内驗證Dicer及調控Dicer的上游分子是否影響癌細胞對sorafenib的敏感性，並分析 評估Dicer與其上游分子在肝癌病人的組織表現及對預後的相關性。 3-1.在動物模式中驗證在sorafenib治療下，Dicer及其上游分子對肝癌細胞產生抗藥過程中的生物意 義。 3-2.收集臨床病人檢體進一步分析Dicer及其上游分子的表現與肝癌抗藥性的關聯性。 若成功執行此計晝，將會使我們對細胞内Dicer參與影響癌細胞行為的分子機制，以及這些調控Dicer 的基因如何影響肝癌進展及抗藥性有更多的瞭解。本計晝中關於表基因調控對肝癌腫瘤幹細胞特性、 藥物敏感性的影響及其機制，也可以在未來發展診斷和選擇適合sorafenib處理的病人時提供更多考量 依據。