腫瘤轉移抑制因子Nm23-H1表現調控機制之研究：基因體起動子平台建立及篩選化療藥物應用

食道癌為高致死率之惡性腫瘤疾病。過去數十年來，儘管在診斷及治療方式皆有進步，食道癌 的整體存活率並無實質之改善，五年存活率仍低於百分之十五。許多研究顯示，腫瘤早期轉移及化 學放射治療抗性為治療失敗的主要因素。Nm23-H1為一腫瘤轉移抑制因子。我們過去研究證實 Nm23-H1在口腔癌的過度表現與頸部淋巴結轉移抑制及抗癌藥物（cisplatin）敏感性有關（Wang et al., Br J Cancer2004）；在食道癌方面，Nm23-H1之顯著低表現與不良預後相關（Wang et al., Eur J Cardiothorac Surg, 2004）。這些臨床研究結果指出Nm23-H1同時參與腫瘤轉移抑制及化療藥物敏感 性之機制。食道癌細胞株的實驗結果，我們進一步證實抑制Nm23-H1含量顯著增強食道癌細胞株 轉移能力及化療藥物抗性，值得關注的，我們亦發現食道癌細胞之Nm23-H1表現可能受到化療藥 物及啟動子甲基化程度調節。然而，Nm23-H1表現與化療藥物調節或基因外修飾之相關性並無資 料可循。基於先前研究觀察，進一步研究此導致早期轉移與抗藥性之因子的表現調控機轉顯得十分 重要，其將在食道腫瘤治療上扮演關鍵角色。本計畫將建立Nm23-H1啟動子活性分析平台，分析 食道癌細胞株啟動子甲基化程度，並利用不同轉移能力之癌細胞株，鑑別調控Nm23-H1表現活性 之啟動子元件（promoter elements），及化療藥物對Nm23-H1轉錄活性影響。此研究將能夠延續並 釐清我們在臨床的發現。本研究預期深入研究Nm23-H1啟動子區域中轉錄調控之機轉，並利用活 性分析平台進一步篩選抑制腫瘤轉移與提高化療敏感性之藥物。此研究將提供新的治療策略於臨床 上克服腫瘤轉移及化療抗性之應用。 本計畫之主要研究目標為： 1. 分析比較 Nm23-H1 啟動子甲基化程度、甲基化區域以及轉錄活性之差異於不同食道癌細胞株 模組(包含不同轉移能力與化療藥物敏感性之食道癌細胞株)。 2. 建立不同長度的 Nm23-H1 啟動子所調控報告基因(reporter gene)之食道癌細胞株模組。並鑑定 Nm23-H1 基因之最小啟動子活性區段、轉錄調控位及其相對應之轉錄調控因子。 3. 利用化療藥物處理不同食道癌細胞株模組，測定其 Nm23-H1 啟動子功能性轉錄調控位，並篩 選出適合抑制食道癌轉移及化療抗性相關之化療藥物。