抗α-Enolase I 抗體於癌症的研究以及它們可能的應用

α-enolase 是一種主要的α-enolase 型式，發現於胚胎發育的早期，同時扮演著非 常多與酵素、結構與接受器功能等相關的角色。除了在自體免疫疾病與細菌感染的角色 外，α-enolase 的表現在許多高度癌症生成或轉移細胞株中都被往上調節，這種現象顯 示這個蛋白可能在癌症的附著以及入侵上扮演某些重要的角色。而且，α-enolase 的表 現與好幾種癌症的產生過程中呈現非常重要的相關性，這種結果顯示它在癌症的形成過 程上也扮演著致病生理上的功能，先前研究報告顯示α-enolase 蛋白量的增加在約65% 非小細胞癌(NSCLC)的病人體內可以偵測到。相反地，高效價的抗α-enolase 抗體量則 只在約7.4%的這類病人身上發現，相對地，這種比例比抗α-enolase 抗體存在非癌症相 關的病人以及正常人身上要低許多。這些研究結果顯示可以特異性地辨認α-enolase 蛋 白的抗體，不僅在研究α-enolase 的表現在肺癌形成的過程中所扮演的可能角色時，是 一種非常有用的工具，同時，抗α-enolase 抗體也可能具有抑制癌症細胞生長或轉移的 作用，因此對於臨床上發展具有潛力價值的檢驗偵測試劑與治療藥物也都是相當重要。 近幾年來，奈米科技廣泛運用於各領域當中，我們也會製造表面修飾有抗體探針 (antibody probe)的奈米粒子，來偵測血清中α-enolase 蛋白是否存在，以提升檢測的靈敏 度。目前初步的結果，我們已經大量表現並且純化人類與細菌的α-enolase 蛋白片段(圖 1)，也在雞隻體內產生很好的的多株IgY 抗體反應(圖1、2)，我們也製造一些anti-α -enolase scFv 抗體分子，不過，它們的特異性與結合能力需要進一步來確認(圖3 至8)。 此外，我們也注射這些蛋白分子到老鼠體內以產生不同於雞隻的單株抗體，已經完成第 三次(圖9)，這些抗體將被用來發展快速、靈敏的檢測試劑，以篩選病人血清中α-enolase 分子，並測試它們抑制癌症細胞生長或轉移的作用。因此我們的研究計劃將完成以下幾 件重要目標。 1. 選殖並表現人類的α-enolase 蛋白。 2. 製造並定性從老鼠與雞隻所產生的多株與單株抗α-enolase 抗體，包括單鏈變異片段 (scFv)。 3. 調查這些抗體對於癌症生成的可能抑制效果。 4. 研究這些抗體的抑制癌症功能過程中可能參與的作用機制。 5. 發展一種高度敏感性方法用來檢測病人血清中所存在的α-enolase 蛋白以及抗α -enolase 抗體。 6. 利用抗體工程技術來人類化所產生具有高親和力的老鼠以及雞隻的抗體，以避免未 來臨床應用時可能產生的人類抗外來抗原蛋白的抗體反應。