氧化壓力促成之氧化還原調適能力以及先天性抗氧化酵素之表達能力在調控人類肝癌細胞株抗化療及抗放療所扮演之角色研究

利用一組表達不同程度的內源性氧化壓力的肝癌細胞株作為研究模式，我們提出 三年的研究計劃，期能闡明下列與肝癌細胞株產生之先天性及後天性抗化療及抗放療 之特性。(一)我們先前發現肝癌細胞株 SK-Hep-1培育於葉酸缺乏情況下，會產生對至 少四種抗癌藥物以及放療的抗性，這個現象是否意味著 SK-Hep-1 細胞有能力調適葉 酸缺乏造成氧化壓力，而啟動所謂的「氧化還原調適反應」(redox adaptation)之機制。 因此，我們將研究到底何種保護機制或抗化療及抗放療之影響因子被啟動。(二) Cisplatin 長久以來已被利用來作為放療的增敏劑，但其機制倘未釐清。我們先前發現 一株抗放療非常強的肝癌細胞株 Mahalvu 是與大量表達三種抗放療影響因子(Bcl-2, surivin 及 GRP-78)有關。我們將設計實驗闡明該細胞大量表達這些因子的機制途徑。 並進一步闡明 cisplatin 對放療增敏劑之機制是否與抑制 Bcl-2,survivin 及 GRP-78 有 關。(三)先前文獻證實癌細胞表現高量的 survivin 是造成抗化療及抗放療的影響因子， 但其機制倘未全盤地釐清。在本研究計劃，我們將以 survivin knockdown 的技術證明 survivin 所扮演的角色是調控高抗氧化酵素的表現，達成強效抑制自由基的能力並對 調控細胞增生的 HIF-2α/Oct 4/c-Myc 的途徑有正面的影響。(四)我們將進行實驗證明 谷胱甘肽合成酶重鏈(γ-GCSh)是造成肝癌細胞株抗化療及抗放療的影響因子，並將以 overexpression 之技術，反證這個現象。(五)我們將進行實證分析這五株肝癌細胞的總 體抗氧化酵素的表達型式，是影響它們產生內源性抗化療及抗放療的成因。