低氧環境下HBX與介白素IL-6調控SUMO加工酵素SENP1與誘導HBV相關肝癌細胞表現幹細胞特性及其臨床意義(3/3)

肝癌近年來高居台灣十大癌症死因之首。不同之致病分子所造成肝癌則有迴異之分子 機轉，然而目前臨床上尚缺乏針對不同病因的肝癌之治療方法。病毒性肝炎所引發的 肝癌是發炎致癌性的經典疾病，而腫瘤微環境中發炎激素對B型肝炎(HBV-HCC)及C 型肝炎(HCV-HCC)呈現不同的致癌分子機轉，其中介白素6 (IL-6)發炎激素則扮演重 要的角色。B型肝炎有關的肝癌則傾向表現早期術後復發，目前IL-6被報告可能與誘 發癌幹細胞基因表現有關；然而相關分子機制並不清楚。因此，了解IL-6如何調控 HBV-HCC表現幹細胞基因將有助於發展針對HBV-HCC病人抗藥性與早期復發之臨床 醫療策略。我們先前的研究成果顯示，SUMO加工酵素SENP1可以調控OCT4蛋白 的穩定性，藉此維持癌細胞中OCT4表現量與其對藥物的敏感性（2012, Cancer Research)。我們進一步在肝癌組織檢體中發現，SENP1與OCT4轉錄程度呈現極高的 正相關性（R2=0.9, n = 119)，有趣的是，其中OCT4/SENP1/serum IL-6高度表現的幾乎 都發生HBV-HCC,，而此HBV-HCC病人較易早期復發。進一步實驗結果發現，IL-6 能有效促進具B型肝炎病毒的Hep3B肝癌細胞株表現SENP1與OCT4;在低氧環境下 高度表現SENP1明顯地促進HIF-2a與OCT4蛋白於不具B型肝炎病毒Huh7細胞表 現。綜合以上這些結果強烈暗示於HBV-HCC癌細胞可能透過低氧環境、發炎細胞激 素IL-6與SENP1之間的交互調控進而影響OCT4在肝癌組織中的表現（請參考初步 研究成果）。重要的問題是，這樣的交互作用是否是HBV-HCC所特有的調控機制？由 於HBV病毒的HBx蛋白已知與肝癌形成直接相關，因此本研究計劃書旨在探討微環 境低氧/發炎細胞激素IL-6是否藉由與HBV病毒之HBx蛋白交互作用，進一步調控 SENP1，與誘發幹細胞特性（如OCT4)的表現。本計晝有三個研究目標： 1、利用Tet-ON-HBx系統高度表現HBx在Huh7細胞中，探討與B型肝炎病毒之HBx 蛋白對於低氧/介白素6 (IL-6)所誘發SENP1與幹細胞相關特性的表現（如OCT4) 的影響（與Tet-OFF-HBx-系統比較，細胞株模式） 2、探討SENP1蛋白於IL-6於Tet-ON-Huh7細胞誘發幹細胞特性表現(如OCT4蛋白) 所扮演的角色（體外細胞株與體内動物模式） 3、驗證血中IL-6濃度、組織中OCT4/SENP1表現量與HBV-HCC病患早期復發之臨 床相關性（利用病患血清檢體、組織檢體微陣列、與冷凍組織檢體）