利用低能量光治療活化NF-kB訊息傳遞迴路之單一活細胞及時監測

本計劃提出以螢光訊號為基礎的量測方法進行單一細胞層級低能量光治療活化NF-kB訊息傳遞迴路之研究，藉由七合一的多功能單一細胞研究平台(包括雷射光鉗操控技術、單分子螢光偵測技術、微流體系統、溫控系統、微尺度表面增益拉曼光譜系統、雷射輔助細胞列印系統以及與顯微鏡自動對焦系統) 不僅可以藉由DCFH-DA螢光染劑進行細胞內氧化壓力的動態觀測，同時利用RFP轉染NF-kB的次單元體p-65，做為追蹤經由低能量光治療所活化NF-kB訊息傳遞迴路。本計畫具體核心目標包括目標一: 建構一個結合微流道細胞培養技術、螢光顯微觀測方法以及可精準控制與定位的近紅外光波段的雷射光源系統、目標二: 整合雙通道螢光影像分光模組，進行ROS以及NF-Kb螢光訊號的同步量測與低能量光治療的照光劑量對細胞內氧化壓力與活化NF-kB振盪模式之關聯性比較、以及目標三: 利用粒線體去耦合劑CCCP以及knockdown細胞色素C氧化酶來抑制ATP的形成，藉以探討當粒線體功能異常時，是否可藉由低能量光治療恢復粒線體原本的功能。預期低能量光治療可作為有效恢復粒線體功能的治療策略與方法。