芳香烴碳水化合物協同劑抑制新血管生成，相關於內皮細胞生長、附著、趨附性之分子機轉研究及白蘆黎醇臨床治療與應用

細胞內的芳香烴接受體(AhR：Aryl hydrocarbon Receptor）， 它 對多環芳香烴類結構相似的物質親合力特強，例如苯並芘、戴奧辛、多 環芳香烴類等環境毒素， 一旦結合形成複合物後， 進入到細胞核內， 會與特定的環境毒素反應元素基因(XRE ： Xenobiotics Responsive Element) 結合， 促使下游基因進行轉錄mRNA， 進而產生一些小蛋 白，危害細胞。環境毒素對生物的毒害包括降低免疫系統能力、心血 管功能異常、肝毒性、畸胎。為積極研究的物件，但對人體的生理學上的 影響，仍存有極大的爭論。尤其對心血管的影響仍屬待探索的領域。 在許多生理的情形下，血管新生作用扮演著重要角色。在正常的傷口癒合、 生理週期、胚胎發育過程中，處處可見血管增生。我們最近發表的兩篇文獻指 出，多環芳香烴類的協同劑(3MC) 抑制粘著斑激酶(Focal adhesion kinase) 之 活性，並抑制細胞附著、移動及血管生成。此外3MC 透過AhR 相關機轉，刺 激p21 及p27 的表達，達到抑制內皮細胞增生的作用。相當重要的芳香烴接 受體拮抗劑，白蘆黎醇可逆轉這些不良影響。此外，我們初步結果已顯示3MC 誘發抗血管新生作用之分子機轉，包括3MC 抑制蛋白中的FAK, Skp2, pAkt 和 eNOS，但促進p21、p27、PTEN 及早期RhoA 之活性。白蘆黎醇為紅酒中重要 的成分，已證實為AhR 的拮抗劑，並具有抗氧化及抗發炎的特性，且有研究指 出白蘆黎醇可增加被oxLDL 降低的Akt/eNOS。此計畫的目標在於研究3MC 抑 制新血管生成的作用及其分子機轉之研究，透過抑制細胞生長、通透性、及附著 力，和釐清白蘆黎醇逆轉之分子作用機制。 第一年研究重點在於，除了細胞核中增加的p27 抑制內皮細胞增生，在細胞 質中增加的部份對細胞遷移的影響，及降低的FAK 和pAkt/eNOS 如何協同性地 抑制細胞生長。第二年研究重點在3MC 降低的pFAK/RhoA/Rock 、 PTEN/pAKT/eNOS/NO 、p27/RhoA 或p27 在細胞中的位置(subcellular localization) 等相關訊息傳遞，如何抑制新血管生成，經由抑制細胞遷移、通透 性、及附著力等影響。於第三年，在細胞內觀察的作用及影響，將在動物實驗中 獲得驗證，包括類血管生成作用(Tubule Formation Assay on Matrigel)、內皮細胞 移動(Endothelial Wounding and Trans-well Migration Assay) 、血管通透性 (Microvessel Permeability)、體內血管新生(Matrigel Plug assay)、和雞胚尿囊絨毛 膜血管增生(Chick Embryo Chorioallantoic Membrane Vascularisation) 的試驗，並 藉由白蘆黎醇逆轉這些不良影響及闡釋其作用機轉。藉此以建立起多環芳香烴 接受體危害心血管的治療基礎，已保護血管內皮細胞完整性，維持正常血管 生成的能力，以降低心血管，甚至中風等疾病的發生。