新穎抗glypican3抗體藥物與其作用機制之研究

磷脂肌醇聚糖 3 (GPC3) 是 HSPGs 家族的一個成員，在某些組織中扮演著腫瘤抑制 的角色，然而，也在其他組織中變成一種癌胚蛋白。GPC3 在 55.7%的肝細胞癌病人、 9.6%的肺癌病人以及 5.7%卵巢腺癌病人身上呈現正向表達。而肝内胆管细胞癌、腎性 細胞癌、前列腺腺泡状腺癌、乳癌、胃癌以及大腸癌則沒有表現，這種結果顯示 GPC3 是一項有用的診斷標的。 GPC3 也是一種肝細胞癌的治療候選標的，具有對抗腫瘤細胞增生以及存活的能 力。合併使用人類化抗 GPC3 抗體 (hGC33) 以及 sorafenib 在肝癌細胞移植的動物模式 上比單獨使用 sorafenib 更有效果。研究顯示，一個具有人類重鏈可變區域的抗體，辨識 一個需要 GPC3 的氨基以及羧基端所產生的結構上抗原決定位，可以抑制 GPC3 陽性細 胞的增生以及對於肝癌細胞轉植的裸鼠呈現明顯的抑制腫瘤生長。結合這些發現，我們 計畫生產嶄新並且可以對抗 GPC 3 的單株抗體，這些抗體可以結合到各式各樣功能性的 區域，並且經由阻斷配位體與接受器之間的交互作用來達到抑制腫瘤生長的目的。而這 些交互作用參與在不同的訊號傳遞路線中，對於了解肝細胞癌以及其他癌症的腫瘤生成 機制上是非常重要的，所有產生的抗體對於發展針對肝細胞癌治療用的抗體藥物以及診 斷的試劑將是非常有用的。本研究將完成以下目標： 1. 選殖、表現並純化人類的 GPC3 蛋白。 2. 利用老鼠與雞隻製備 anti- GPC3 IgG 與 IgY 多株抗體。 3. 利用噬菌體展現抗體技術(phage display antibody technology)製備 scFv 單株抗體。 4. 測試這些 anti- GPC3 抗體對於癌症生成的可能抑制效果。 5. 研究這些抗體的抑制癌症功能過程中可能參與的作用機制。 6. 發展一種高度敏感性方法用來檢測癌症病人血清中可能存在的 GPC3 蛋白。 7. 製備高親和力的嵌合性(chimeric)或人類化(humanized)的抗體，以避免臨床應用時可 能產生的人類抗外來抗原蛋白的抗體反應。