Nm23-H1表現之轉錄及表觀遺傳調控機轉研究:抗腫瘤及轉移藥物之Nm23-H1起動子篩選平台應用(2/3)

Nm23-H1（又稱為NME1或Nm23A）是最早被定義的腫瘤轉移抑制基因，也有最多 臨床預後的相關資料證實。一般認為Nm23-H1的高表現能改善許多癌症的預後（包含乳 癌、胃癌、頭頸癌、肝癌、黑色素瘤、及非小型細胞肺癌）。我們過去臨床研究證實Nm23-H1 在口腔癌的過度表現與頸部淋巴結轉移抑制及抗癌藥物（cisplatin）敏感性有關（Wang et al., Br J Cancer2004）；在食道癌方面，Nm23-H1之顯著低表現與不良預後相關（Wang et al., Eur J Cardiothorac Surg, 2004）。這些臨床研究結果清楚的指出Nm23-H1的表現對腫 瘤預後的影響力。食道癌細胞株的實驗結果，我們進一步證實抑制Nm23-H1含量顯著增 強食道癌細胞株轉移能力及化療藥物抗性，值得關注的，我們亦發現食道癌細胞之 Nm23-H1表現會受到化療藥物及啟動子甲基化程度調節。然而，Nm23-H1表現與化療藥 物調節或基因外修飾之相關性並無資料可循。基於先前研究觀察，進一步研究此導致早 期轉移與抗藥性之因子的表現調控機轉顯得十分重要。本計畫將設計新檢驗方式分析食 道癌細胞株啟動子甲基化程度，建立Nm23-H1啟動子活性分析平台，並利用不同轉移能 力之癌細胞株，鑑別調控Nm23-H1表現活性之啟動子元件（promoter elements），及化療 藥物對Nm23-H1轉錄活性影響。此研究將能夠延續並釐清我們在臨床的發現。本研究預 期深入研究Nm23-H1啟動子區域中轉錄調控之機轉，並利用活性分析平台進一步篩選抑 制腫瘤轉移與提高化療敏感性之藥物。此研究將提供新的治療策略於臨床上克服腫瘤轉 移及化療抗性之應用。 本計畫之主要研究目標為： 1. 設計高靈敏度及快速檢驗方式（甲基化靈敏之高解析度溶解曲線分析）來應用於不 同轉移能力或抗藥性表現型食道癌細胞株之Nm23-H1 啟動子區域甲化程度分析。 2. 建立不同長度的 Nm23-H1 啟動子所調控報告基因(reporter gene)之食道癌細胞株模 組。並鑑定Nm23-H1 基因之最小啟動子活性區段、轉錄調控位及其相對應之轉錄調 控因子。 3. 利用抗癌藥物處理不同癌細胞株模組，測定其Nm23-H1 啟動子功能性轉錄調控位， 並篩選出適合抑制食道癌轉移及化療抗性相關之化療藥物