二氫?啶誘發牙齦肥厚症可經由抑制IkB之降解以減少睪固酮受體調控之膠原蛋白的產生

Dihydropyridine-induced gingival overgrowth (DIGO) 是 dihydropyridines 治療高血 壓所產生的副作用。nifedipine 是一種 dihydropyridine，可活化 androgen receptor (AR) 的 signal transduction，增加膠原蛋白產生，目前尚無藥物治療，因此需探討 DIGO 的 治療方法。 本計畫目標是確認 NF-κB 在 dihydropyridines 誘發 DIGO 過程中的重要性，進而 抑制 NF-κB 以治療 DIGO。構想緣由是因 electrophoretic mobility shift assay 初步證實 NF-κB 可與源自 AR 基因 promotor 的 DNA probe 結合；已有學者指出 NF-κB 可促 進 AR 產生，因此我們推測 DIGO 病人牙齦細胞進行 NF-κB/AR/膠原蛋白的途徑，導 致牙齦組織肥厚。計畫前兩年分別以取自健康人體及 DIGO 病人的牙齦細胞做研究， 投與 nifedipine 及 IL-1β，誘導細胞以 AR/CTGF/collagen axis 進行反應，第三年則以 nifedipine 建立的 DIGO 大鼠做研究。 第一年先以 chromatin immunoprecipitation assay 進一步證明 NF-κB 確與 AR 基 因 promotor 在細胞內亦可結合，而 nifedipine 及 IL-1β 加強 NF-κB 結合在AR 基因 的 promotor，因而導致膠原蛋白增加。實驗並探討 PI3K 和 AKT 是否參予調控 NF-κB 與AR 基因的 promotor 結合。第二年基於 proteasome inhibitors 因抑制 IκB 分解而有 抗發炎作用，因此以 proteasome inhibitors (MG132, epigallocatechin gallate (EGCG) 和 bortezomib) 的投與受 nifedipine 及 IL-1β 刺激的牙齦細胞，減少 NF-κB 進入細胞核 與 AR promotor 結合，使下游的膠原蛋白產量減少；但是 proteasome inhibitors 的作用 較少特異性，我們再佐以針對 NF-κB 且特異性的 shRNA 投與細胞，進一步證實 NF-κB 在 dihydropyridine 或 IL-1β 誘發膠原蛋白產生的重要性。第三年以 DIGO 大 鼠評估 EGCG 和 bortezomib 對 DIGO 的治療效果。我們期待 proteasome inhibitors 在DIGO的治療上，藉由其對於調控 AR 基因的 promoter 活性進而減少膠原蛋白的產 生而可以做為一個治療藥物的選擇。