以實驗細胞株，體外人體組織培養和臨床方法探討新發現沙門氏菌致病基因之特性

非傷寒沙門氏菌是引起全世界嚴重疾病和病人死亡的重要細菌性病原。沙門氏菌和腸道上皮之間的早期互動反應多從動物模式中得知，但是在人類的狀況並不清楚。前驅計畫中將1,440株沙門氏菌的轉介子突變株通過實驗室中培養的HEp-2上皮細胞，將感染前後的細菌株混合庫萃取細菌DNA，經由轉介子導向插入基因部位定序（TraDIS）之新技術，已成功發現六個與細菌附著和入侵上皮細胞（intergenic sucD-cydA, glyA, yqiC, wzxE, and rfaI）與在細胞內複製的相關基因（speG）。 本研究計畫的目的，在於（一）利用基因部位導向突變細菌技術 (site-directed mutagenesis)製造出特定單一基因突變之突變沙門氏菌菌株，（二）藉由在實驗室細胞培養（如HEp-2細胞，方向性 Caco-2細胞，及LS174T細胞）和人類腸道組織體外培養（polarized human intestinal ex vivo organ culture）來測試這些基因突變細菌株，對基因特性進一步瞭解，並研究沙門氏菌之致病性（細菌附著上皮細胞、入侵上皮細胞與在上皮細胞內複製）及宿主反應（如IL-8，defensins之蛋白質和基因表現），（三）藉由比較由有無菌血症或嚴重臨床症狀沙門氏菌病人，以及對特定抗生素有無抗藥性所得到之細菌培養檢體對這些基因之表現程度，進一步探討這些基因在臨床上的重要性。 經由上述對這些未發表基因的徹底研究，這些基因的代表細菌突變株有望成為發展預防（如口服疫苗）與治療（如標靶藥物治療）非傷寒沙門氏菌新策略的重要利器。