以組織工程再生保存未成熟雄性睾丸的生殖能力 - 基因轉殖鼠模式

具有功能之雄性生殖細胞依賴生殖幹細胞(精原幹細胞, Spermatogonial stem cells-SSC)產生，在雄 性出生後，生殖細胞會形成精子並將遺傳訊息傳衍至下一代。冷凍保存是一項有前瞻性的醫學應用， 特別是未成年癌症患者及瀕臨絕種的生物。然而不同的冷凍保護劑對不同細胞的生物毒性與保護性不 同。因此冷凍保存有不同大小，複雜性和膜通透性等各種細胞類型的睾丸組織帶來了挑戰。細胞支架 (Scaffold)是目前很熱門的一項再生醫學研究，能提高細胞存活率與生長速度。配合生物冷光異體移植 可明確地識別生殖細胞移植後的生長情況，同步進行同種系異體移植及活體追蹤。本研究之目的在於 冷凍保存後應用細胞支架進行同種系異體保存提升精原幹細胞數量，以利於研究及臨床應用。 1. 從不具有生殖能力的初生基因轉殖小鼠取得睪丸組織，冷凍保存或搭配 Scaffold移植至無生殖能力 之去勢未成熟小鼠，評估 Scaffold對於新鮮睪丸組織及冷凍睪丸組織於活體內之修復與再生之情況。 2. 使用 Scaffold支架當組織再生的模板，是再生醫學的基礎。不論附著，增殖，遷移或分化，細胞對 不同材質有不同的反應。然而當前的生物材料知識仍為現象學。為了使組織工程更加進步，必須研究 材質對幹細胞分化的影響。 3. 應用非侵入性的生物冷光檢定細胞存活數，佐以常見的細胞活性分析MTT assay、BrDU assay評估 組織存活率及增生率，用以評估 Scaffold對冷凍保存小鼠重建精子形成作用與修復生殖力之影響。 4. 小鼠重建精子形成後生殖能力測試及產下子代對子代的影響。