家族性淋巴水腫之基因鑑定及功能探討

家族性淋巴水腫(Lymphedema)主要是遺傳性的基因突變，造成血管發育異常而 產生血管壓迫，使得淋巴液無法回流，肢體末端腫脹。在台灣的家族性淋巴水腫的致 病基因，沒有相關的研究。我們以全基因組外顯子定序技術，分析一個三代家族中成 員的突變基因，四位為發病、一位健康的成員。經由分析11 個已知與家族性淋巴水 腫的致病基因的突變位點，並沒有發現可能的突變基因。我們進一步比對所有家族成 員的突變基因位點，結果有二個基因位點(Fam104BP63R 與IGSF3S651I)為可能造成這個 家族發病的原因。目前並沒有Fam104B 基因功能的報導，IGSF3 基因功能的報導只 有一篇，且與淋巴水腫疾病沒有相關。本計畫將以斑馬魚血管螢光轉殖魚tg(fli:EGFP) 作為動物模式，分析篩選出的兩個突變基因對斑馬魚血管發育的影響，以找出造成家 族性淋巴水腫的致病基因。我們將在tg(fli:EGFP)中表達突變與正常的fam104b 與igsf3 基因，分析對血管發育的影響。以CRISPR-Cas9 技術將斑馬魚的fam104b 與igsf3 基 因剔除，分析這兩個候選突變基因對血管發育的影響，再以突變與正常的fam104b 與igsf3 基因進行修復實驗。以RNA-Seq、LC-MS/MS 及生物資訊的分析技術，探討 fam104b 與igsf3 調控血管發育的訊號機制。經由這個計畫，我們將鑑定出台灣本土 家族性淋巴水腫的致病基因，將來可在臨床上檢測家族性淋巴水腫的病人，並註解這 個基因的功能。