人類第二條染色體上抑癌基因單套數缺失與卵巢亮細胞癌紫杉醇抗藥性的研究

卵巢亮細胞癌（OCCA）在台灣和日本的發生率已知較其他國家或地區而言有較 高的趨勢。且不似其他上皮性卵巢癌，OCCA 多與子宮內膜異位症同時出現，且多 於腫瘤局限於卵巢階段便被診斷到。紫杉醇(paclitaxel)對於一般上皮性卵巢癌或較末 期的卵巢癌有不錯的治療效果;但就 OCCA 病人而言,對紫杉醇或含鉑化療藥物卻有 高的抗藥性，此種具抗藥性的患者多有較為惡性的腫瘤，且其預後也較差。紫杉醇 的抗癌作用主要是因其不可逆地抑制細胞內微管活性，但卻在癌細胞逐漸發展出抗 藥性時,紫杉醇的抑制微管活性便會受阻。已有研究指出可能有多種機制可以解釋上 皮性卵巢腫瘤對化療藥物產生抗性的原因，包括有癌幹細胞的存在、具抗藥性細胞 的增加、腫瘤微環境的改變、藥物進出細胞或解毒及 DNA 修復等路徑的異常，導 致訊號傳遞驅使癌細胞存活。但這些似乎都無法解釋卵巢亮細胞癌具高紫杉醇抗性 的特質。為了解其中的基因機制，我們利用比較基因組雜交微陣(CGH microarray) 分析 OCCA 癌細胞株 ES-2 及在本實驗室中建立對紫杉醇具更高抗性的 ES2-TR120 及 ES2-TR300 細胞株在基因體上全面性的差異。就所偵測到在基因體套數上差異的 多條染色體中, 兩株 ES2-TR 細胞在第二條染色體上相較於原始的 ES-2 細胞基因 體，出現有大區域的基因不穩定性，也就是其基因劑量少了一半的套數 (haplo-insufficiency)。為深入了解這種在具高紫杉醇抗性的細胞上針測到的基因體不 穩定性與細胞對紫杉醇高抗性的相關性，我們因此提出本計劃針對位於第二條染色 體上所偵測到 haplo-insufficiency 區域中的抑癌基因(tumor suppressor genes, TSGs)其 基因劑量、功能的改變及可能影響的細胞活性及調控路徑與細胞呈現的紫杉醇高抗 性之相關性加以探討。本研究的中心假設為在人類第二條染色體上多個抑癌基因的 haplo-insufficiency 共同作用可改變卵巢亮細胞癌對紫杉醇的敏感性。本研究創新的 想法在於對卵巢亮細胞癌化療抗性的產生提出在宏觀染色體上因多個抑癌基因劑量 的減少而觸發細胞轉型為較衰老的狀態、衰減細胞死亡、使癌細胞因此能逃離化療 藥物的毒殺作用，產生抗性。以下是本計劃所欲完成的明確目標: 目標一: 瞭解位在第二條染色體上的 RHOB、 SPTBN1 及 RND3 三個抑癌候選基 因單獨或同時發生 haplo-insufficiency 是否會影響細胞形態及其黏附和移動能力，進 而使細胞在受到紫杉醇作用時藥物毒性無法呈現而使細胞產生對紫杉醇的高抗性。 目標二: 瞭解位在第二條染色體上的 CASP8、 BOK、 ATG16L1 及 CAPN13 四 個抑癌候選基因單獨或同時發生 haplo-insufficiency 是否會干擾藥物誘發的細胞凋亡 及自噬作用得發生，使細胞躲避藥物的毒殺而存活呈現對紫杉醇具抗性的表徵。 目標三: 瞭解位在第二條染色體上與細胞衰老有關的抑癌候選基因 C2orf40 (Ecrg4)，其因藥物長期作用所出現的 haplo-insufficiencyin 是否會改變細胞因藥物作 用誘發的衰老狀態，以逃避紫杉醇的毒殺致使細胞呈現對紫杉醇的抗性。