麩醯胺添加對敗血症小鼠肝臟中Akt/mTORC2/FoxO1路徑之影響

敗血症是臨床上重症病人常見的併發症，其所引發的多重器官衰竭(Multiple organ dysfunction syndrome, MODS)是造成病人死亡的主原因之一。敗血症所引發之肝臟衰竭較為少見，主因為肝臟功能失調不容易察覺。一旦肝臟功能喪失代表敗血症已進入嚴重的病程。Rapamycin在哺乳類動物細胞標靶(mammalian Target of Rapamycin, mTOR)是細胞內一個控制細胞生長及營養狀態的serine/threonine激酶。mTOR依照其他組合蛋白質的不同分為mTORC1及mTORC2，但mTORC2目前較少被探討。mTORC2構造包含mTOR、 deptor、mSin1、protor、Rictor及mLST8蛋白質組成，當中rictor為主要調節者。mTORC2在肝臟中對於營養素之代謝及免疫的調控扮演重要角色，mTORC2主要活化PI3K/Akt/FoxO1路徑，進而使SREBP1及GK基因活化，以調控血糖。而肝臟中的庫佛細胞(kupffer cell, KC)亦會受到mTORC2的影響，研究發現mTORC2可使KC在肝臟中偏向具有吞噬及修復能力之M2。麩醯胺(glutamine, GLN)為快速分裂的細胞能量來源並具有免疫調節作用。故GLN在異化性疾病狀態下是一種必需胺基酸。本實驗室先前研究顯示，GLN 添加可改善敗血症引發之肺臟及腎臟器官受損之狀態。但並無針對肝臟的相關實驗。故利用三年的時間進行系列的研究，第一年體外實驗，將初代KC培養於不同濃度的GLN培養液中，並LPS刺激後觀察TLR4/PI3K/Akt /mTORC2/FoxO1路徑之變化，以了解M1/M2的比例。第二年進行體外實驗，培養初代小鼠肝細胞，並利用經LPS刺激後KC所分泌之條件培養液共同培養，觀察肝細胞細胞IRS/Akt/ mTORC2 /FoxO1路徑之變化，以了解肝細胞對營養素利用及其凋亡狀態。第三年為體內實驗，給與敗血症小鼠靜脈注射GLN營養支持，觀察對肝臟中Akt / mTORC2 /FoxO1路徑之影響，了解肝臟代謝營養素及免疫調控之情形，並評估肝臟受損的狀況。