探討活化轉錄因子3調控microRNA 的分子機轉及臨床上的應用(3/3)

先前我們對微型核醣核酸(microRNA,or miRNA)在腎臟損傷的研究中，發現 miR-494 能調控 ATF3 基因的表現。然而，現今的報告也指出轉錄因子 (Transcriptional factor, TF)也能調控 microRNA 的表現，進而導致生理現象的改 變。轉錄因子和 microRNA之間相互的調控，顯示它們扮演重要的生理和病理角 色。然而有關 ATF3 是如何調控 microRNA，至今仍無相關的報告。我們先前的 數據利用腎臟上皮細胞經缺氧再灌流或大量表現 ATF3 後，收集細胞經由 microRNA array分析後發現，有許多的 microRNA增加或減少，其中 miR-16等的 表現量與 control 組有明顯的統計上差異(Fig.1)，我們更進一步利用 in vitro的實 驗大量表現 ATF3後發現 ATF3會促進 miR-16的表現(Fig.2)。從此初步的結果， 我們假設轉錄因子 ATF3 可能會調控 miR-16，進而影響腎臟在缺氧再灌流後的生 理病理現象。因此此三年期計畫主要的目的就是要釐清，在腎臟中，ATF3 到底 是如何調控 miR-16，且到底除了 miR-16 之外是否有其它的 miRs 能被 ATF3 調 控，進而影響腎臟的功能此外，在 ATF3調控下的 miR-16的 下游基因為何，進 而造成 ATF3在腎贓損傷中是扮演一保護的角色，也是我們研究的重點。下列為 未來三年要完成的目標: 1. 確認在 in vitro 情形下，ATF3與所能調控的 miR-16或其它 miRs 之間的關係 及分子機轉 (第一年)。 2. 確認在 in vivo 情形下，ATF3所調控的 miRs(如 miR-16)在腎臟生理或病理上 扮演一重要角色並確認這些 miRs 可作為 preclinical 的工具(第二年)。 我們之前的研究指出急性腎損傷病人的尿液中，miR-494, 16 及 ATF3 (exosome) (Fig.3)皆會增加。同時，這三者中 miR-16可作為偵測急性腎損傷的生 物標記，因此在第二年完成基礎研究後，我們要完成下列實驗以證明這些被 ATF3 所調控的 microRNA在臨床醫學上可以作為檢測腎損傷的 一個生物標記。 3. 確認 ATF3所調控的 miRs(如 miR-16)能在尿液中偵測出，並能作為檢測急性 腎損傷的生物標記 (第三年)