血小板濃縮液在軟骨上的抗老化效果及其相關機轉: 以纖維連接蛋白為模式探討(2/3)

關節軟骨可由於身體老化、運動過度、體重過重而導致關節軟骨過度磨損，或是受 到外力撞擊而致使軟骨受損，也可能由於自體免疫異常或是先天遺傳疾病而導致軟骨受 損，其中退化性關節炎是全世界最常見的關節疾病。 本實驗室於前年國科會研究計畫，進行纖維連接蛋白之基因多型性分析，其中 1:c.4252+204T>A 在病例組與對照組基因型之分佈達統計顯著差異，成果已投稿且複審 修正中，將於近期接受刊登 (Journal BMC Musculoskelet Disord; manuscript ID:8240665181103232)。現在執行的計晝為探討纖維連接蛋白片段對人類關節軟骨細胞 及半月板纖維軟骨細胞之作用，成果豐富：纖維連接蛋白片段(30 kDa)可以誘發關節軟 骨細胞產生第二型環氧化酶上升之發炎性反應，導致類鐸受器 (TLR)表現增加之免疫現 象，同時發現 IL6 及 IL8 表現顯著上升。 連續本實驗室的研究成果，現提出新的三年研究計畫，題目為，血小板濃縮液在軟 骨上的抗老化效果及其相關機轉：以纖維連接蛋白為模式探討。PRP (platelet-rich plasma) 為含有高濃度血小板的血漿。病人的血液經過離心與純化後，由分層的血清中得到高濃 度的血小板，再由活化釋放出多類生長因子，細胞便可以發揮高效的刺激生長與分化能 力，PDGF、TGF、VEGF、EGF等，可促進細胞的增生、移動、分化、膠原蛋白合成、 及血管新生的作用。預期由 PRP 之機轉研究，能探討其於治療上的效用。本實驗室已有 之初步結果(n=3)顯示，以 PRP 與 30 kDa Fibronectin fragments 共同作用於軟骨細胞，可 以降低 IL6 及 IL8 表現，PRP 對 TLR2 上升也有明顯抑制作用，機轉與 AKT 及 MAPK 活化有關。因此提出假設：PRP 可經由對 TLR2 抑制作用，進而降低纖維連接蛋白片段 造成的退化性關節炎。 因此計畫之執行分年分述如下： 第一年：再收集病例，進行關節軟骨細胞、半月板細胞、及滑膜細胞培養，探討 PRP 之相關抗發炎及 TLR2 表現抑制效用。並以 cDNA 微陣列分析方式找尋基因影響。 第二年：主要研究主軸為詳細機轉之探討，藉由更多病例，以磷酸化或細胞激素 Array membrane之篩選，找出特異之訊息傳導路徑及後續對細胞生長等功能影響。 第三年：建立 ex vivo 模式模擬關節鏡之實際治療下，組織可能產生之生理病理反應， 彙整前二年之細胞反應結果，進行組織模式之機轉分析。