甲基轉移酵素變異之乳癌臨床相關性研究與其作為癌症標靶治療之細胞與動物模式分析(3/3)

背景及重要性：乳癌是全世界女性最常見的癌病，世界一年約有50 萬人死於乳癌，尋找 更重要的乳癌致病分子標的來作為開發效果好、毒性低的癌症新藥之標靶，是近年來發 展癌症標靶藥物重點之ㄧ。癌症是累積了基因序列 (Genetic) 及外顯基因 (Epigenetic) 兩者的變異所導致的結果。CpG 島群上的過度甲基化被認為是癌症中最主要的外顯基因 變異。其甲基化發生於抑癌基因啟動子，可阻止轉錄因子的作用，並導致抑癌基因的不 表現。而甲基轉移酵素（DNA methyltransferase, DNMT）即是負責將甲基加到CpG 序列 上，因此值得去分析是否在乳癌腫瘤組織中呈現甲基轉移酵素有過度表現，而造成其下 游之抑癌基因不表現導致癌化，此外若甲基轉移酵素的確過度表現，此酵素則很值得去 開發其抑制劑，來檢測是否會成為具有高潛力的新穎抗乳癌藥物之標靶。 研究設計：藉由real-time PCR 來分析150 位乳癌病人的腫瘤及其正常上皮組織中甲基 轉移酵素的mRNA 表現，且同時也使用免疫組織染色來偵測其蛋白質表現，相較於正常 乳房組織，在腫瘤組織是否有過度大量表現的情形，及其是否與癌症轉移及病人預後有 相關性。並將國內外學者合作取得之生藥，檢測抑制酵素活性、癌細胞生長、活細胞中 去甲基化活性、活化抑癌基因之能力、造成細胞凋亡、抑制細胞轉移能力的情形，並搭 配乳癌賀爾蒙化療藥物來看是否可減少細胞的抗藥性，並進行動物實驗活體檢 驗，來顯示在未來能否有潛力能成為新穎乳癌抗癌藥物。 初步研究結果：偵測到甲基轉移酵素DNMT1 及 DNMT3B 在乳癌組織中的確有高表達 的情形，分別為(4/7, 57.1%) 及 (7/10, 70%)。此外，從篩選的約五十多種的天然物中， Curcumin 類似物、Phenolics 衍生物、Ubiquinone 衍生物、Sesquiterpene 衍生物已 發現具抑制甲基轉移酵素活性的能力。而Ubiquinone 衍生物LTH-0909-1 對甲基 轉移酵素的抑制作用會隨著藥物濃度增加。使用乳癌細胞株MDA-MB-231 處理 Ubiquinone 衍生物三天即可偵測到細胞生長明顯受到抑制，並增加抑癌基因RAR β的mRNA 表現量及啟動子去甲基情形，另外ESR1 基因表現量也有極為顯著增加。